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    本篇教你如何操作使用全自動(dòng)固相萃取儀
    更新時(shí)間:2022-10-22   點(diǎn)擊次數:2157次
      我想大家對全自動(dòng)固相萃取儀都經(jīng)不怎么陌生了,那么究竟該如何使用呢?今天就讓我們一起來(lái)了解一下,話(huà)不多說(shuō)下面一起看看吧。
     
      全自動(dòng)固相萃取儀的操作使用方法:
     
      1.選擇小柱或濾膜
     
      小柱或濾膜的大小與規格應視樣品中待測物的濃度大小而定。對于濃度較低的體內樣品, 一般應選用盡量少的固定相填料萃取較大體積的樣品。
     
      2.活化
     
      萃取前先用充滿(mǎn)小柱的溶劑沖洗小柱或用5-10ml 溶劑沖洗濾膜使填料保持濕潤, 因為填料干燥會(huì )降低樣品保留值,而各小柱的干燥程度不一,也會(huì )影響回收率的重現性。
     
      3.上樣
     
      一般可采取以下四種方法:
     
      (1) 用0.1mol/L 酸或堿調節, 使pH<3或pH>9, 離心取上層液萃取;
     
      (2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白質(zhì)后取上清液, 以水或緩沖液稀釋后萃取;
     
      (3)用酸或無(wú)機鹽沉淀蛋白質(zhì)后取上清液, 調節pH 值后萃取;
     
      (4)超聲15min后加入水、緩沖液, 取上清液萃取。流速應控制為1ml/min, 流速快不利于待測物與固定相結合。
     
      4.淋洗
     
      反相SPE的清洗溶劑多為水或緩沖液, 可在清洗液中加入少量有機溶劑、無(wú)機鹽或調節pH值。加入小柱的清洗液應不超過(guò)一個(gè)小柱的容積, 而SPE濾膜為5~10ml。
     
      5.洗脫
     
      應選用5~10ml離子強度較弱但能洗下待測物的洗脫溶劑。若需較高靈敏度, 則可先將洗脫液揮干后, 再用流動(dòng)相重組殘留物后進(jìn)樣。體內樣品洗脫后多含有水, 可選用冷凍干燥法。保留能力較弱的SPE 填料可用小體積、較弱的洗脫液洗下待測物,再用極性較強的HPLC 分析柱分析洗脫物。
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