日常使用高效液相色譜儀的要求及維護方法，話(huà)不多說(shuō)下面一起來(lái)了解一下吧。
 

　　一、 流動(dòng)相的要求
 

　　高效液相色譜儀是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的，因此要求流動(dòng)相具備以下特點(diǎn)：
 

　　1、純度 流動(dòng)相必須用HPLC級的試劑，使用前過(guò)濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45um或更細的膜過(guò)濾)。溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累，會(huì )影響色譜柱的使用壽命。
 

　　2、溶解度 樣品的溶解度要適宜如果溶解度，如果溶解度欠佳樣品會(huì )在柱頭沉淀，不但影響純化分離，還會(huì )縮短柱子的使用壽命。
 

　　3、粘度要低(應<2cp) 高粘度溶劑會(huì )影響溶質(zhì)的擴散、傳質(zhì)，降低柱效，還會(huì )使柱壓降增加，使分離時(shí)間延長(cháng)。最好選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動(dòng)相。
 

　　4、樣品易于回收。應選用揮發(fā)性溶劑。
 

　　5、流動(dòng)相 PH 采用反相色譜法分離弱酸(3≤pKa≤7)或弱堿(7≤pKa≤8)樣品時(shí)，通過(guò)調節流動(dòng)相的pH值，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留，并改善峰形的技術(shù)稱(chēng)為反相離子抑制技術(shù)。
 

　　對于弱酸，流動(dòng)相的pH值越小，組分的k值越大，當pH值遠遠小于弱酸的pKa值時(shí)，弱酸主要以分子形式存在;對弱堿，情況相反。
 

　　分析弱酸樣品時(shí)，通常在流動(dòng)相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液;分析弱堿樣品時(shí)，通常在流動(dòng)相中加入少量弱堿，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液。
 

　　二、色譜泵的使用與維護
 

　　液相色譜泵的使用和維護注意事項 為了延長(cháng)泵的使用壽命和維持其輸液的穩定性，必須按照下列注意事項進(jìn)行操作：
 

　　1 防止任何固體微粒進(jìn)入泵體，因為塵?；蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會(huì )磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥，因此應預先除去流動(dòng)相中的任何固體微粒。流動(dòng)相最好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是濾過(guò)，可采用Millipore濾膜(0.2µm或0.45µm)等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應經(jīng)常清洗或更換。
 

　　2 泵工作時(shí)要留心防止溶劑瓶?jì)鹊牧鲃?dòng)相被用完，否則空泵運轉也會(huì )磨損柱塞、缸體或密封環(huán)，最終產(chǎn)生漏液。
 

　　3 輸液泵的工作壓力決不要超過(guò)規定的最高壓力，否則會(huì )使高壓密封環(huán)變形，產(chǎn)生漏液。