熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數，從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結構情況。
 

　　通過(guò)對這些參數的測定， 不但可以做一般的定量分析， 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化， 從而闡明分子結構與功能之間的關(guān)系。
 

　　熒光分光光度計的激發(fā)波長(cháng)掃描范圍一般是190~650nm，發(fā)射波長(cháng)掃描范圍是200~800nm?？捎糜谝后w、固體樣品(如凝膠條、粉末)的光譜掃描。
 

　　下面讓我們一起來(lái)了解一下熒光分光光度計的運行原理吧
 

　　由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中，激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光，熒光經(jīng)過(guò)濾過(guò)和反射后，被光電倍增管所接受，然后以圖或數字的形式顯示出來(lái)。
 

　　物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài)， 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩定的，在返回基態(tài)的過(guò)程中將一部分的能量又以光的形式放出，從而產(chǎn)生熒光.
 

　　不同物質(zhì)由于分子結構的不同，其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征，這種特征反映在熒光上表現為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜，因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來(lái)定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。
 

　　在溶液中，當熒光物質(zhì)的濃度較低時(shí)，其熒光強度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系，即IF=KC，利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析，與紫外-可見(jiàn)分光光度法類(lèi)似，熒光分析通常也采用標準曲線(xiàn)法進(jìn)行。