如何使用熒光分光光度計是一個(gè)很重要的問(wèn)題，那么今天就讓我們一起來(lái)了解一下具體該如何使用吧。
 

　　一、硬件操作
 

　　熒光分光光度計在使用時(shí)，需要注意開(kāi)機次序，以保護設備之間不受影響。熒光光譜儀開(kāi)機順序一般為先開(kāi)氙燈，然后開(kāi)儀器主機，最后開(kāi)跟儀器連接的計算機。
 

　　如此操作的原因在于穩態(tài)氙燈是高壓點(diǎn)亮，為了避免瞬問(wèn)脈沖電流對周?chē)O備造成影響，需要先開(kāi)氙燈，等電流穩定后再打開(kāi)周邊的電腦等設備。關(guān)機順序則相反。
 

　　二、軟件操作
 

　　熒光定量分析多采用工作曲線(xiàn)法，即以已知量的標準物質(zhì)，按試樣相同方法處理后，配成一系列標準溶液，測定其相對熒光強度和空白溶液的相對熒光強度;
 

　　扣除空白值后，以熒光強度為縱坐標，標準溶液濃度為橫坐標，繪制工作曲線(xiàn);然后將處理后的試樣配成一定濃度的溶液，在同一條件下測定其相對熒光強度，扣除空白值后，從工作曲線(xiàn)上求出熒光物質(zhì)的含量。
 

　　在用熒光分析法測定某些會(huì )引起熒光改變的微量物質(zhì)時(shí)，常采用差示熒光法，可使熒光強度的讀數差距拉大，使熒光強度的降低加大，從而提高方法的靈敏度和準確度。
 

　　下面以日立F-4500熒光分光光度計的使用為例，具體介紹如何在儀器上進(jìn)圖譜掃描、濃度分析等定性、定量測試操作。
 

　　1.圖譜掃描(WavelengthScarl)簡(jiǎn)明操作：
 

　?、俅蜷_(kāi)光譜儀電源開(kāi)關(guān)(POwER)，5s后再按下氙燈點(diǎn)燈按鈕，當氙燈點(diǎn)燃后，再接通主開(kāi)關(guān)(MAIN)。此時(shí)主開(kāi)關(guān)上方綠色指示燈連續閃動(dòng)三下，然后開(kāi)計算機、顯示器、打印機。計算機進(jìn)入操作系統。
 

　?、谶\行FL-Solution控制軟件。
 

　?、劢⒃囼灧椒?發(fā)射光譜)，設置測量參數：點(diǎn)擊快捷欄“Method”后，立即顯示了分析方法(AnalysisMethod)的五個(gè)重疊界面，分別為“常規”(Gen—eral)、“儀器條件”(Instnlinent)、“模擬畫(huà)面”(Mmlitor)、“處理”(Processing)、“報告”(Report)。
 

　　下面詳細介紹每個(gè)界面：?jiǎn)螕?ldquo;常規”按鈕，測量方式選擇波長(cháng)掃描Wave一1ength);單擊“儀器條件”按鈕，掃描方式選為發(fā)射波長(cháng)掃描。
 

　　激發(fā)波長(cháng)的輸入范圍為200～900nm，發(fā)射起始波長(cháng)的輸入范圍200～890nm，發(fā)射終止波長(cháng)的輸入范圍210～900nm。選定合適的掃描速度、延遲時(shí)間、發(fā)射單元狹縫、光電倍增管負高壓，設置發(fā)射單元狹縫、響應速度、重復次數等參數。
 

　?、苓M(jìn)行樣品掃描：將待測樣品倒人四面通光的石英比色皿中，并將其放入儀器的樣品架中。點(diǎn)擊測量按鈕，儀器便開(kāi)始對樣品進(jìn)行掃描測量。
 

　?、荽鎯呙枳V圖：在文件菜單“另存為”，輸入文件名，按“保存”將數據保存。
 

　?、薮蛴∽V圖：打印樣品掃描譜圖。
 

　?、邷y試結束，將比色皿取出，清洗，晾干。退出軟件，關(guān)閉計算機，在軟件上將氙燈熄滅，待其冷卻到室溫時(shí)才關(guān)光譜儀主機。
 

　　注意：測試結束不要急于關(guān)閉光譜儀主機電源。務(wù)必等到氙燈冷卻后，才關(guān)光譜儀主機?？梢詫⑹址旁趦x器主機上面左側的散熱窗口處，感受其溫度，直到其溫度降到室溫時(shí)，才能關(guān)閉光譜儀主機。