液相色譜儀對于多數人來(lái)說(shuō)都是很好上手的儀器了，但是就算是用過(guò)幾年、經(jīng)驗豐富的分析員都會(huì )習慣于一些錯誤的操作(師傅教錯了?)，經(jīng)常導致一些儀器故障。方便快捷的分析過(guò)程固然重要，但是為了多做樣品而忽略了一些*的步驟，往往得不償失，哪些操作不能做呢?下面就讓我們一起來(lái)了解一下吧。
 

　　1、流動(dòng)相不過(guò)濾
 

　　因為塵?；蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會(huì )磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥，因此應預先除去流動(dòng)相中的任何固體微粒。流動(dòng)相好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是濾過(guò)，可采用Millipore濾膜(0.2μm或0.45μm)等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應經(jīng)常清洗或更換。
 

　　2、使用后沒(méi)有及時(shí)清洗泵
 

　　流動(dòng)相不應含有任何腐蝕性物質(zhì)，含有緩沖液的流動(dòng)相不應保留在泵內，尤其是在停泵過(guò)夜或更長(cháng)時(shí)間的情況下。如果將含緩沖液的流動(dòng)相留在泵內，由于蒸發(fā)或泄漏，甚至只是由于溶液的靜置，就可能析出鹽的微細晶體，這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等。
 

　　因此，必須泵入純水將泵充分清洗后，再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相，可以是甲醇或甲醇-水)。
 

　　3、流動(dòng)相走空
 

　　泵工作時(shí)要留心防止溶劑瓶?jì)鹊牧鲃?dòng)相被用完，否則空泵運轉也會(huì )磨損柱塞、缸體或密封環(huán)，終產(chǎn)生漏液。
 

　　4、沒(méi)有流動(dòng)相流出，又無(wú)壓力指示怎么辦?
 

　　可能是泵內有大量氣體，這時(shí)可打開(kāi)泄壓閥，使泵在較大流量(如5ml/min)下運轉，將氣泡排盡，也可用一個(gè)50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個(gè)可能原因是密封環(huán)磨損，需更換。
 

　　5、壓力和流量不穩了?
 

　　原因可能是氣泡，需要排除;或者是單向閥內有異物，可卸下單向閥，浸入丙酮內超聲清洗。有時(shí)可能是砂濾棒內有氣泡，或被鹽的微細晶?；蜃躺奈⑸锊糠侄氯?，這時(shí)，可卸下砂濾棒浸入流動(dòng)相內超聲除氣泡，或將砂濾棒浸入稀酸(如4mol/L硝酸)內迅速除去微生物，或將鹽溶解，再立即清洗。
 

　　6、壓力為啥過(guò)高或過(guò)低?
 

　　可能是是管路被堵塞，需要清除和清洗。壓力降低的原因則可能是管路有泄漏。檢查堵塞或泄漏時(shí)應逐段進(jìn)行。
 

　　在進(jìn)行梯度洗脫時(shí)，由于多種溶劑混合，而且組成不斷變化，因此帶來(lái)一些特殊問(wèn)題，必須充分重視:
 

　　PS:(在液相色譜中對組分復雜的樣品采用梯度洗脫的方法。在同一個(gè)分析周期中，按一定程序不斷改變流動(dòng)相的濃度配比，稱(chēng)為梯度洗脫。從而可以使一個(gè)復雜樣品中的性質(zhì)差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的。
 

　　梯度洗脫的優(yōu)點(diǎn):1.縮短分析周期;2.提高分離能力;3.峰型得到改善，很少拖尾;4.增加靈敏度。但有時(shí)引起基線(xiàn)漂移。)